目錄**章基因載體概論 1 **節(jié)基因工程與基因載體 1 第二節(jié)基因載體分類 2 一、按照功能分類 2 二、按照來源分類 4 三、按照是否整合分類 5 四、按照目的分類 6 第三節(jié)基因載體結(jié)構(gòu) 6 一、質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu) 6 二、噬菌體載體結(jié)構(gòu) 11三、噬菌粒載體結(jié)構(gòu) 13四、黏粒載體結(jié)構(gòu) 15五、人工染色體載體結(jié)構(gòu) 15六、病毒載體結(jié)構(gòu) 16第四節(jié)基因表達(dá)系統(tǒng) 17總結(jié)與展望 17參考文獻(xiàn) 18第二章原核表達(dá)載體 20**節(jié)原核表達(dá)系統(tǒng)概述 20一、原核表達(dá)系統(tǒng)歷史 20二、原核表達(dá)系統(tǒng)組成 21三、原核表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用 22第二節(jié)原核表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與功能 23一、原核表達(dá)載體分類 23二、原核表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 24三、常用原核表達(dá)載體 31第三節(jié)原核表達(dá)載體優(yōu)化 35一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 35二、其他優(yōu)化策略 37總結(jié)與展望 40參考文獻(xiàn) 40第三章酵母表達(dá)載體 43**節(jié)酵母表達(dá)系統(tǒng)概述 43一、酵母表達(dá)系統(tǒng)歷史 43二、酵母表達(dá)系統(tǒng)組成 44三、酵母表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用 49第二節(jié)酵母表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與功能 52一、酵母表達(dá)載體分類 52二、酵母表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 57三、常用酵母表達(dá)載體 65第三節(jié)酵母表達(dá)載體優(yōu)化 68一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 68二、其他優(yōu)化策略 71總結(jié)與展望 73參考文獻(xiàn) 73第四章昆蟲表達(dá)載體 79**節(jié)昆蟲表達(dá)系統(tǒng)概述 79一、昆蟲表達(dá)系統(tǒng)歷史 79二、昆蟲表達(dá)系統(tǒng)組成 80三、昆蟲表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用 83第二節(jié)昆蟲表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與功能 87一、昆蟲表達(dá)載體分類 87二、昆蟲表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 91三、常用昆蟲表達(dá)載體 92第三節(jié)昆蟲表達(dá)載體優(yōu)化 94一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 94二、其他優(yōu)化策略 106 總結(jié)與展望 107參考文獻(xiàn) 107 第五章哺乳動(dòng)物表達(dá)載體 111**節(jié)哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)概述 111一、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)歷史 111二、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)組成 113三、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用 117第二節(jié)哺乳動(dòng)物表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與功能 118一、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體分類 118二、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 119三、常用哺乳動(dòng)物表達(dá)載體 124 第三節(jié)哺乳動(dòng)物質(zhì)粒載體優(yōu)化 131 一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 131 二、其他優(yōu)化策略 142 總結(jié)與展望 149 參考文獻(xiàn) 150 第六章病毒表達(dá)載體 154 **節(jié)基因治療表達(dá)系統(tǒng)概述 154 一、基因治療歷史 154 二、基因治療表達(dá)系統(tǒng)組成 155 第二節(jié)腺病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與應(yīng)用 157 一、腺病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 157 二、腺病毒表達(dá)載體優(yōu)化 160 三、腺病毒表達(dá)載體應(yīng)用 161 第三節(jié)腺相關(guān)病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與應(yīng)用 162 一、腺相關(guān)病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 163 二、腺相關(guān)病毒表達(dá)載體優(yōu)化 164 三、腺相關(guān)病毒表達(dá)載體應(yīng)用 165 第四節(jié)逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與應(yīng)用 166 一、逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 167 二、逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體優(yōu)化 168 三、逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體應(yīng)用 169第五節(jié)慢病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與應(yīng)用 170 一、慢病毒表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 170 二、慢病毒表達(dá)載體優(yōu)化 172 三、慢病毒表達(dá)載體應(yīng)用 172 總結(jié)與展望 173 參考文獻(xiàn) 174 第七章植物表達(dá)載體 177 **節(jié)植物表達(dá)系統(tǒng)概述 177 一、植物表達(dá)系統(tǒng)歷史 177 二、植物表達(dá)系統(tǒng)組成 179 三、植物表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用 180 第二節(jié)植物表達(dá)載體結(jié)構(gòu)與功能 183 一、植物表達(dá)載體分類 183 二、植物表達(dá)載體結(jié)構(gòu) 187 三、常用植物表達(dá)載體 196 第三節(jié)植物表達(dá)載體的優(yōu)化 201 一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 201 二、其他優(yōu)化策略 212 總結(jié)與展望 215 參考文獻(xiàn) 215 第八章人工染色體載體 220 **節(jié)人工染色體載體概述 220 一、人工染色體載體歷史 220 二、人工染色體載體應(yīng)用 221 第二節(jié)人工染色體載體結(jié)構(gòu)與功能 226 一、人工染色體載體分類 226 二、人工染色體載體結(jié)構(gòu) 226 三、常用人工染色體載體 232 第三節(jié)人工染色體載體優(yōu)化 237 一、載體骨架結(jié)構(gòu)優(yōu)化 237 二、其他優(yōu)化策略 238 總結(jié)與展望 239參考文獻(xiàn) 239 第九章基因編輯載體 242 **節(jié)基因編輯系統(tǒng)概述 242 一、基因編輯系統(tǒng)歷史 242 二、基因編輯系統(tǒng)組成 244 三、基因編輯系統(tǒng)應(yīng)用 246 第二節(jié) CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能 250 一、CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)分類 251 二、CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)結(jié)構(gòu) 251 三、常用 CRISPR/Cas9基因編輯載體 255 第三節(jié) CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)優(yōu)化 256 一、合理設(shè)計(jì) sgRNA分子 257 二、設(shè)計(jì) Cas9突變體及其類似物 259 三、調(diào)節(jié) sgRNA-Cas9復(fù)合物濃度 263 四、選擇合適遞送系統(tǒng) 264 五、調(diào)控細(xì)胞修復(fù)通路 266 總結(jié)與展望 267 參考文獻(xiàn) 267 第十章基因表達(dá)載體操作實(shí)例 271 **節(jié)原核表達(dá)載體操作實(shí)例 271 一、材料 271 二、方法 272 三、注意事項(xiàng) 280 第二節(jié)昆蟲表達(dá)載體操作實(shí)例 280 一、材料 280 二、方法 281 三、注意事項(xiàng) 284 第三節(jié)植物表達(dá)載體操作實(shí)例 285 一、材料 285 二、方法 285 三、注意事項(xiàng) 288第四節(jié)哺乳動(dòng)物表達(dá)載體操作實(shí)例 288 一、材料 288 二、方法 289 三、注意事項(xiàng) 291 第五節(jié) CRISPR/Cas9基因編輯操作實(shí)例 292 一、材料 292 二、方法 293 三、注意事項(xiàng) 298 總結(jié)與展望 298 參考文獻(xiàn) 299 中英文對(duì)照表 300