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黑果枸杞組培無性系的刺:第一部

作者：王欽美著
出版社：東北大學出版社出版時間：2024-09-01
開本： 26cm 頁數(shù)： 162頁
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黑果枸杞組培無性系的刺:第一部 版權信息

黑果枸杞組培無性系的刺:第一部 內(nèi)容簡介

黑果枸杞(Lyciumruthenicum)為茄科枸杞屬灌木，其兼具抗旱、抗寒、耐鹽堿、耐踐踏等特性。黑果枸杞是非常重要的生態(tài)經(jīng)濟樹種，開發(fā)利用前景廣闊。植物刺類型多樣，可分為枝刺(莖刺)、葉刺、皮刺、葉面刺、果實刺和葉緣刺等。野生黑果枸杞整株布滿枝刺，枝刺起源于葉腋處的刺原基，有維管組織與莖相連，堅硬不易剝離。枝刺不但給造林者、管理者及采摘者造成極大困擾，而且降低了經(jīng)濟林的總體效益。枝刺是影響采果類經(jīng)濟樹種的不利性狀，其無刺或刺弱化類型更易做經(jīng)濟林栽培。通過遠緣雜交和調(diào)查，均未發(fā)現(xiàn)果實黑色且無刺(或刺弱化)的理想枸杞。培育無刺或刺弱化的黑果枸杞迫在眉睫。深入到分子層面的枝刺研究，難度大且起步較晚。我們的實驗發(fā)現(xiàn)黑果枸杞種子萌發(fā)為種苗后，均會快速形成莖刺。但是，令人振奮的是，我們發(fā)現(xiàn)黑果枸杞的組培無性系在試管內(nèi)時均無刺；這些植株移栽盆內(nèi)置于玻璃溫室內(nèi)，還會有部分植株長期維持無刺狀態(tài)；而同一無性系的其他植株有刺。同一無性系的有刺和無刺植株是珍貴且值得繼續(xù)研究的材料。因此，我們課題組基于此材料開展了刺形態(tài)發(fā)育觀察，鎖定繼續(xù)研究的取材部位。生理實驗發(fā)現(xiàn)蔗糖促進該無性系枝刺發(fā)生，生長素IAA抑制該無性系枝刺發(fā)生；诖耍覀冇掷^續(xù)探索了蔗糖促進枝刺發(fā)生和IAA抑制枝刺發(fā)生的相關基因及機理。然后，我們建立了黑果枸杞農(nóng)桿菌介導的穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化體系，通過轉(zhuǎn)基因開展基因功能研究，以期培育出無刺或刺弱化黑果枸杞。本書將詳細介紹以黑果枸杞莖、葉和未開放花朵為外植體的組織培養(yǎng)(組培)，組培植株移栽及養(yǎng)護，組培植株刺表型及其發(fā)育觀察，蔗糖促進黑果枸杞組培無性系枝刺發(fā)生的機理探索，生長素IAA抑制黑果枸杞組培無性系枝刺發(fā)生機理探索，基于穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化研究LrSUS對黑果枸杞枝刺發(fā)生的影響這幾部分內(nèi)容。

黑果枸杞組培無性系的刺:第一部 目錄

以黑果枸杞莖、葉為外植體的組培及其體細胞無性系變異1.1材料與方法1.1.1試驗材料1.1.2試驗方法1.1.3數(shù)據(jù)分析1.2結(jié)果與分析1.2.1黑果枸杞愈傷組織、不定芽及叢生芽的誘導1.2.2 MSAP分析1.3討論與結(jié)論1.3.1黑果枸杞微繁殖1.3.2 DNA甲基化變異與位點特異性MSAP.1.3.3結(jié)論以黑果枸杞未開放花朵為外植體的組培及玻璃化去除2.1材料與方法2.1.1試驗材料2.1.2無菌材料的獲取2.1.3外植體誘導脫分化和再分化2.1.4饑餓干燥結(jié)合AgNO,去除玻璃化2.1.5 RNA-Seq分析....2.1.6qRT-PCR2.1.7透射電子顯微鏡觀察2.1.8激光共聚焦顯微鏡觀測及葉綠素含量測定2.1.9植物激素代謝組分析2.1.10總可溶性蛋白的測定2.1.11數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析2.2結(jié)果與分析2.2.1不同PGR組合對脫分化和再分化的影響2.2.2饑餓干燥結(jié)合AgNO,處理去除芽叢玻璃化2.2.3 RNA-Seq分析2.2.4 qRT-PCR驗證RNA-Seq結(jié)果可靠2.2.5黒果枸杞解除玻璃化葉片葉綠體結(jié)構(gòu)恢復2.2.6黑果枸杞解除玻璃化葉片葉綠素含量升高2.2.7黑果枸杞解除玻璃化葉片各類植物激素含量變化2.2.8黑果枸杞解除玻璃化葉片總可溶性蛋白含量升高討論與結(jié)論.2.3.1討論2.3.2結(jié)論第3章蔗糖促進黑果枸杞組培無性系枝刺發(fā)生3.1材料與方法。3.1.1試驗材料3.1.2黑果枸杞枝刺的發(fā)育觀察3.1.3 RNA-Seq3.1.4qRT-PCR驗證3.1.5內(nèi)源糖含量測定3.1.6
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